Учёные ПИМУ разработали тест-систему, позволяющую на ранней стадии диагностировать лейкоз у коров

Разработанная учёными ПИМУ совместно ООО «НПО «Диагностические системы» тест-система позволяет выявить суммарно все антитела к белкам вируса лейкоза КРС (p24 и gp51) в образцах сыворотки крови и молока, что значительно повышает чувствительность и специфичность анализа. Особенностью тест-системы является и то, что она позволяет выявлять наличие антител на ранних стадиях заболевания.

Оздоровление стада крупного рогатого скота от лейкоза — одна из ключевых задач современного животноводства. При заболевании вирус заражает лимфоциты и интегрирует провирус в геном клеток. Провирусная ДНК обнаруживается в молочных и мясных продуктах. Заболевание, входящее в «Перечень заразных, в том числе особо опасных, болезней животных, по которым могут устанавливаться ограничительные мероприятия (карантин)», утвержденный приказом Минсельхоза России от 19 декабря 2011 года N 476 наносит значительный экономический ущерб.

По данным из открытых источников, ущерб от недополученного молока из-за вспышек лейкоза КРС российским хозяйствам составляет от 2,6 до 4,19 миллиардов рублей в год. Он складывается из потерь молока 20%, снижения привесов, преждевременной выбраковки коров, утилизации туш и органов при убое животных, падеже коров от лейкоза, рождения слабого, нежизнеспособного молодняка, потерь от пастеризации молока для внутрихозяйственного потребления, проведения оздоровительных мероприятий.

“Специфика лейкоза в том, что в его развитии различаются бессимптомная, гематологическая и клиническая стадии. В бессимптомной и гематологической стадиях у животных характерные клинические признаки болезни отсутствуют. Характерными клиническими признаками болезни в период клинической стадии у восприимчивых животных являются: увеличение лимфатических узлов, появление опухолей в различных частях тела, нарушение половых циклов, гипотония преджелудков, отеки или двусторонний экзофтальм (пучеглазие), исхудание, снижение молокоотдачи, выпадение шерстного покрова на голове и холке. Бессимптомная стадия может протекать несколько лет, при этом животное будет распространять инфекцию.” - отмечает руководитель Центра агробиотехнологий ПИМУ Елена Дабахова.

Возбудителем лейкоза крупного рогатого скота является РНК-содержащий вирус лейкоза крупного рогатого скота. Передача возбудителя осуществляется контактным, алиментарным, внутриутробным, ятрогенным и трансмиссивным путями. Факторами передачи возбудителя являются кровь, молоко, секреты и экскреты больных восприимчивых животных и инфицированных восприимчивых животных, а также другие объекты внешней среды, контаминированные возбудителем. Поскольку это вирус, то заражение идет достаточно быстро.

В соответствии с действующими нормами весь крупный рогатый скот не менее 1 раза в год проходит обследование на лейкоз (для племенных животных – 2 раза в год). Кроме этого обследование проводят при покупке, продаже, перемещении скота, при возникновении симптомов заболевания. Недостоверный результат анализа приводит к экономическому ущербу. С диагностической тест-системой «ДС-ИФА-АНТИ-BLV» риск ошибок значительно снижается.

До появления тест-системы «ДС-ИФА-АНТИ-BLV» иммуноферментный метод анализа реализовывался с использованием импортных наборов реагентов (США, страны ЕС), которые ушли (уходят) с российского рынка. Кроме этого, используются тест-системы немногочисленных отечественных производителей. Основными проблемными моментами существующих средств диагностики являются высокая вероятность ложных результатов на ранних стадиях инфекции, необходимость верификации результатов в подтверждающем тесте, что значительно увеличивает стоимость диагностических мероприятий. Данные проблемы во многом обусловлены тем, что во всех представленных на рынке тест-системах мишенями являются только антитела, распознающие антиген gp51.

"Здоровье человека начинается с того, что он ест. Нам принципиально важно отрабатывать технологии развития сельского хозяйства с учетом тенденций в медицине, компетенций медицинского вуза. Медицинскими технологиями для развития сельского хозяйства мы начали заниматься еще в 2020 году, опираясь на запросы регионов и отрасли. Одним из пунктов программы развития вуза, поддержанной с 2021 года программой “Приоритет 2030”,  было содействие технологическому развитию сельского хозяйства. Мы открыли специализированные лаборатории, 5 вивариев, без которых невозможна отработка методов ПЦР диагностики и других генетических исследований, необходимых, в том числе, и для сельского хозяйства. То есть сейчас мы получаем первые результаты многолетней последовательной работы. Сегодня, когда не только медицина, но и сельское хозяйство, чувствуют технологическое давление западных партнеров, проект, который был заблаговременно запущен, стал еще более востребованным," - рассказал Николай Карякин, доктор медицинских наук, ректор Приволжского исследовательского медицинского университета. 

Разработанная в ПИМУ тест система “ДС-ИФА-АНТИ-BLV” использует метод иммуноферментного анализа. В тест-системе «ДС-ИФА-АНТИ-BLV» впервые реализован «сэндвич» формат ИФА на основе рекомбинантных антигенов gp51 и р24, который определяет все классы антител к обоим белкам, что значительно повышает эффективность серологической диагностики лейкоза КРС, обеспечивая возможность выявления инфекции на ранней стадии и высокую достоверность результатов анализа. Применение рекомбинантных антигенов увеличивает специфичность теста, вследствие чего отсутствует необходимость верификации результата в подтверждающем тесте. По диагностической эффективности «ДС-ИФА-АНТИ-BLV» превосходит существующие на рынке аналоги, параллельно снижая затраты на диагностические мероприятия.

К настоящему времени в рамках централизованной закупки для Министерства сельского хозяйства Российской Федерации заключены три государственных контракта на поставку диагностикумов «ДС-ИФА-АНТИ-BLV» в объеме 1621 набор суммарно. Уже сегодня она используется в ветеринарных лабораториях, входящих в систему Государственной ветеринарной службы РФ, в Белгородской, Кемеровской, Ленинградской, Липецкой, Пензенской, Саратовкой областях, Республике Башкортостан, Калмыкия, Коми, Татарстан и многих других регионах России. Исследования по оценке возможностей новой тест-системы продолжаются.